摘要

目的研究低氧条件下微小RNA-210(miRNA-210)靶向低氧诱导因子1α(HIF-1α)对人胃癌细胞系SGC-7901的影响,并探讨其机制。方法体外培养人胃癌细胞系SGC-7901,分别经0、100、150、200、300μmol/L氯化钴(CoCl2)作用3 h后,继续培养48 h,CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移能力;培养密度至80%~90%时,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺组织中miR-210水平变化,蛋白免疫印记(WB)检测HIF-1α、增殖细胞核抗原(PCNA)、胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白变化情况。200μmol/L CoCl2条件下转染antagomic miR-210,WB检测HIF-1α蛋白变化情况。结果与0μmol/L CoCl2组比较,100μmol/L CoCl2组OD450、迁移细胞数量、miR-210、PCNA、β-catenin表达升高(P<0.05),150、200、300μmol/L CoCl2组OD450、迁移细胞数量、miR-210、HIF-1α、PCNA、IMP3、β-catenin表达升高(P<0.05)。与100μmol/L CoCl2组比较,150μmol/L CoCl2组OD450、迁移细胞数量、miR-210、HIF-1α、IMP3、β-catenin表达升高(P<0.05),200、300μmol/L CoCl2组OD450、迁移细胞数量、miR-210、HIF-1α、PCNA、IMP3、β-catenin表达升高(P<0.05)。与150μmol/L CoCl2组比较,200μmol/L CoCl2组OD450、迁移细胞数量、miR-210、HIF-1α、PCNA、IMP3表达升高(P<0.05),300μmol/L CoCl2组OD450、迁移细胞数量、miR-210、HIF-1α、PCNA、IMP3、β-catenin表达升高(P<0.05)。与200μmol/L CoCl2组比较,300μmol/L CoCl2组OD450、miR-210、β-catenin表达升高(P<0.05)。Targetscan预测结果显示,HIF-1α基因3’UTR区与miR-210有结合位点,低氧条件下,200μmol/L CoCl2组和200μmol/L CoCl2+antagomic NC组差异无统计学意义(P>0.05),200μmol/L CoCl2+antagomic组细胞中HIF-1α表达水平降低(P<0.05)。结论缺氧诱导miR-210、HIF-1α上调表达,促进人胃癌细胞系SGC-7901细胞的增殖和迁移。

  • 单位
    青海仁济医院