摘要
目的探讨环状RNA circ-MYBL2在前列腺癌组织中的表达及影响前列腺癌发生和转移的分子机制。方法选取2017年2月—2021年4月荆门市第二人民医院泌尿外科收治的45例前列腺癌患者手术切除的前列腺癌组织和癌旁组织。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测前列腺癌组织和癌旁组织中circ-MYBL2的表达差异、前列腺癌细胞系和永生化前列腺导管上皮细胞中circ-MYBL2的表达差异, 筛选circ-MYBL2低表达细胞系, 分别转染circ-MYBL2质粒(circ-MYBL2组)或阴性对照质粒(对照组)至前列腺癌细胞。qRT-PCR检测circ-MYBL2质粒转染效率。CCK-8法和细胞划痕实验分别检测circ-MYBL2对细胞增殖和迁移能力的影响。starBase v2.0软件分别预测circ-MYBL2作用的miRNA及miRNA的靶基因。用双荧光素酶报告基因实验验证circ-MYBL2和miRNA之间的调控关系。qRT-PCR分别检测circ-MYBL2对miRNA表达的影响及miRNA对靶基因mRNA表达的影响。Western blotting检测靶基因蛋白和Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示, 多样本均数间比较采用单因素方差分析, 两样本均数间比较采用t检验。结果前列腺癌组织中, circ-MYBL2表达量显著低于癌旁组织, 差异具有统计学意义(P<0.01)。前列腺癌细胞系中, circ-MYBL2表达量显著低于前列腺导管上皮细胞, DU-145细胞表达量最低, 差异均具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比, circ-MYBL2组DU-145细胞circ-MYBL2表达量显著增加(P<0.01), circ-MYBL2能够降低DU-145细胞的增殖活性(P<0.05)和迁移能力(P<0.01)。circ-MYBL2作为海绵吸附miR-324-3p, miR-324-3p互补结合SUFU基因。circ-MYBL2抑制miR-324-3p的表达(P<0.01), SUFU基因表达增加(P<0.01), Wnt/β-catenin信号通路转导被抑制。结论 circ-MYBL2通过吸附miR-324-3p促进SUFU基因的表达, 抑制Wnt/β-catenin信号通路, 进而降低前列腺癌细胞增殖活性和迁移能力。
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单位荆门市第二人民医院; 荆楚理工学院