肉葡萄球菌电转化条件的优化

作者：张变强; 唐巧巧; 柯灵超; **; 王德培; 朱燕; 高强^*

来源：天津科技大学学报, 2019, 34(03): 8-14.

DOI：10.13364/j.issn.1672-6510.20170319

• 肉葡萄球菌
• 电转化
• 转化效率

肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作为革兰氏阳性菌,遗传转化难度大是限制其遗传操作的主要因素之一.通过优化菌体生长状态、电击缓冲液、复苏培养基组分等条件,分析了各因素对S.carnosus TM300电转化效率的影响.研究表明:S.carnosus TM300在B2生长培养基中生长到A578=0.6时收集菌体,使用GS电击缓冲液洗涤菌体制备感受态细胞,在电压2 450 V、间距2 mm电转杯条件下进行电转化,电击后立即加入LBM复苏培养基,37℃、180 r/min摇床复苏培养4 h,可以获得的最佳电转化效率为5.95×103μg-1.

• 单位
  生物工程学院; 工业发酵微生物教育部重点实验室; 天津科技大学