AT基因13387-9delG突变引起遗传性抗凝血酶缺陷症的分子病理机制研究

作者：傅启华; 王文斌; 丁秋兰; 周荣富; 武文漫; 胡翊群; 王学锋; 严力行; 王振义; 王鸿利

来源：中国实验诊断学, 2004, 8(05): 462-465.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4287.2004.05.004

• 抗凝血酶
• 基因
• 突变

目的　研究AT基因 13387 9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制。方法　用大引物法构建 13387 9delG突变体AT重组表达质粒 (ATM) ,并将其和正常AT重组表达质粒 (ATN)分别用Superfect 试剂转染COS7细胞或CHO细胞 ,进行体外表达试验、脉冲追踪试验以及细胞免疫荧光染色。结果　ATM转染的COS7细胞培养上清液中检测不到AT抗原 ,而在细胞裂解液中 ,其AT抗原仅为转染ATN的 2 7 13%。脉冲追踪试验发现 ,在ATM转染的COS7细胞培养上清液中 ,检测不到3 5S标记的AT蛋白 ,在chase 0min时 ,ATM细胞内3 5S标记的AT蛋白只有ATN的 2 7 8% ;在chase 180min时 ,ATM细胞内3 5S标记的AT蛋白为 0min时的 5 0 %左右。细胞免疫荧光试验的结果表明 ,ATM转染的CHO细胞内荧光强度明显低于ATN转染的CHO细胞。结论　编码的突变AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解 ,是AT基因 13387 9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制

• 单位
  上海第二医科大学; 瑞金医院; 浙江省血液中心