摘要

目的 基于程序性细胞死亡受体蛋白-1/程序性细胞死亡配体蛋白-1(PD-1/PD-L1)信号通路研究食管癌细胞株TE-1抑制共培养T细胞的活化、增殖并促进其凋亡的影响。方法 通过体外细胞转染构建TE-1/PD-L1细胞,TE-1/mock细胞,检测转染后的PD-L1表达判断转染效果。设置4组实验对象:CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+IgG抗体、CD8+T细胞+TE-1/mock细胞+IgG抗体、CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+PD-L1抗体、CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+PD-1抗体。以酶联免疫吸附(ELISA)法比较4组间CD8+T细胞γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)水平;以细胞计数法-8(CCK-8)比较4组间细胞增殖情况;以胱天蛋白酶-3(caspase-3)活性检测试剂盒检测4组间CD8+T细胞的凋亡情况。结果 TE-1组、TE-1/mock组、TE-1/PD-L1组PD-L1的水平分别为4.72±0.68、5.04±0.54和12.21±1.35,表明转染后TE-1/PD-L1细胞的PD-L1表达水平显著升高。CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+IgG抗体组、CD8+T细胞+TE-1/mock细胞+IgG抗体组、CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+PD-L1抗体组和CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+PD-1抗体组上清的IFN-γ水平分别为(107.80±4.97)、(154.00±10.02)、(153.00±9.62)和(145.00±17.28)pg·mL-1,TNF-α水平分别为(18.80±2.59)、(36.60±4.51)、(37.00±4.90)和(36.60±3.21)pg·mL-1,IL-10水平分别为(47.20±16.99)、(115.00±6.60)、(109.60±5.94)和(116.20±8.79)pg·mL-1。CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+IgG抗体组的上述指标与CD8+T细胞+TE-1/mock细胞+IgG抗体组、CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+PD-L1抗体组、CD8+T细胞+TE-1/PD-L1细胞+PD-1抗体组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 食管癌细胞株TE-1通过PD-1/PD-L1信号通路来抑制共培养T细胞的活化、增殖并促进其凋亡。

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