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摘要
猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）Nsp14蛋白是PEDV的一种非结构蛋白，由于它同时具有核酸外切酶活性和N7-甲基转移酶活性，在病毒的生命周期中发挥重要作用。为了对PEDV Nsp14蛋白进行更加深入的研究，从病变猪小肠中提取总RNA，并通过PCR扩增获取PEDV Nsp14基因，经过双酶切与连接试验，最终将其连接到PRK5-Myc载体上。通过构建PEDV Nsp14真核重组表达载体，并通过Western Blot技术和免疫荧光技术在真核细胞中验证其蛋白表达情况和细胞内定位情况，为后续研究PEDV Nsp14蛋白的功能奠定研究基础。
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