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摘要
目的·从多囊卵巢综合征患者卵泡液中分离提取外泌体并进行鉴定,明确卵泡液中外泌体的存在;从外泌体中分离提取miRNAs并检测其表达量。方法·利用膜亲和法提取卵泡液中外泌体,透射电镜观察大小和形态;利用流式细胞仪检测外泌体蛋白标志物CD63和CD81的表达;提取纯化外泌体miRNAs,利用Taq Man探针real-time PCR检测miR-125b、miR-19b和miR-222的表达。结果·透射电镜下观察到卵泡液外泌体呈圆形或椭圆形,直径30~100 nm,有完整的膜结构,内含低密度物质;流式细胞仪检测外泌体CD63和CD81呈阳性表达。Real-time PCR检测到外泌体中miR-125b、miR-19b和miR-222的表达。结论·多囊卵巢综合征患者卵泡液中可以收集到外泌体,可以通过电子显微镜和流式细胞仪对卵泡液中的外泌体进行鉴定。卵泡液外泌体中含有miR-125b、miR-19b和miR-222。
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单位浙江大学医学院附属妇产科医院; 上海交通大学
