HADHA通过调节PI3K/AKT信号通路抑制人绒毛膜滋养细胞HTR-8/SVneo迁移与侵袭

作者：吴芝红; 王永恒; 刘太行; 阮灵灵; 谢游龙; 李方方; 丁裕斌^*

来源：四川大学学报（医学版）, 2022, 53(05): 805-814.

• HADHA
• HTR-8/SVneo细胞
• 迁移
• 侵袭
• PI3K/AKT

目的 探讨羟酰基辅酶A脱氢酶α亚基（hydroxyacyl-CoA dehydrogenase alpha subunit, HADHA）对人绒毛膜滋养细胞HTR-8/SVneo迁移和侵袭能力的影响及其潜在作用机制。方法 通过组织免疫荧光染色检测HADHA在6～8周正常早孕绒毛及复发性自然流产绒毛样本中表达水平的差异；慢病毒系统构建HADHA过表达及敲低稳转HTR-8/SVneo细胞系，并采用qRT-PCR、Western blot、Transwell、细胞划痕实验评价HADHA对HTR-8/SVneo细胞迁移侵袭能力和相关基因表达的影响；转录组测序及生物信息学分析筛选HADHA可能调控的靶基因及信号通路；加入蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)抑制剂明确HADHA调节HTR-8/SVneo细胞迁移侵袭的具体分子机制。结果 HADHA在复发性自然流产样本的绒毛外滋养层（extravillous trophoblast, EVT）中较正常对照组中高表达。过表达HADHA的HTR-8/SVneo细胞中迁移侵袭相关基因HLA-G、MMP2、MMP9、NCAD的表达水平降低（P<0.01,P<0.05），且迁移和侵袭能力减弱（P<0.05）；敲低HADHA后，基因HLA-G、MMP2、MMP9、NCAD的表达水平增高（P<0.01,P<0.05），且迁移和侵袭能力增强（P<0.05）。此外，过表达HADHA后p-PI3K、p-AKT水平降低（P<0.05）,PI3K/AKT信号通路被抑制；敲低HADHA后PI3K/AKT信号通路被激活。在HADHA敲低稳转细胞系中加入AKT抑制剂MK-2 206后，细胞迁移侵袭能力较对照敲低组减弱（P<0.01,P<0.05）。结论 HADHA通过抑制PI3K/AKT信号通路抑制HTR-8/SVneo细胞的迁移与侵袭。

• 单位
  重庆医科大学