脂联素基因修饰内皮祖细胞移植对缺血性脑卒中小鼠神经保护作用的研究

作者：沈琳辉; 王书鸿; 缪婕^*

来源：诊断学理论与实践, 2022, 21(06): 691-696.

DOI：10.16150/j.1671-2870.2022.06.005

• 脂联素
• 内皮祖细胞
• 脑缺血
• 血管新生

目的：观察脂联素(adiponectin,APN)修饰的内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)对缺血性脑卒中模型小鼠脑组织修复和神经功能恢复的作用。方法：构建表达APN基因的慢病毒并转染EPC，将过表达APN的EPC移植至短暂性大脑中动脉缺血(transient middle cerebral artery occlusion,tMCAO)模型小鼠脑内，即为EPC-APN组，另设EPC组[移植EPC-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)]及空白对照组(磷酸盐缓冲液处理)。在tMCAO术后1、7、14 d，用焦油紫染色测量梗死面积，并对小鼠进行神经行为学评分；观察tMCAO术后14 d在梗死周边区检测血管新生情况；采用TUNEL检测内源性细胞的凋亡情况。采用蛋白印迹法检测小鼠血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)。结果：成功制备过表达APN的EPC。EPC-APN组小鼠在脑缺血后第14天的脑萎缩体积百分比，较EPC组和空白对照组相比显著减少(7.2%±0.9%比11.6%±1.2%比16.2%±2.1%,P<0.01)。EPC-APN组小鼠的内源性细胞凋亡数目百分比与EPC组及空白对照组相比明显降低(1.0%±0.1%/mm2比2.1%±0.2%/mm2比11.2%±3.2%/mm2,P<0.05);EPC-APN组小鼠的神经行为学评分[改良神经损害严重程度评分(modified neurological severity score,mNSS)]更低[(3.2±0.3)分比(4.5±0.3)分比(5.8±0.4)分，P<0.05];EPC-APN组小鼠脑内的血管新生数目显著增多[(6.2±0.8)个/mm2比(1.8±0.2)个/mm2比(0.2±0.1)个/mm2,P<0.01)。EPC-APN组VEGF蛋白的表达水平较EPC组、空白对照组增加，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：移植经APN基因修饰的EPS，能减轻小鼠的缺血性脑损伤，改善其神经功能。

• 单位
  同济大学附属东方医院; 上海交通大学医学院附属瑞金医院; 神经内科