山羊痘病毒南疆株P32基因的原核表达及其结构分析

作者：宋书婷; 焦海宏; 张孝忠; 李有文^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2019, (04): 83-180.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.02.0183

• 山羊痘病毒
• 南疆株
• P32蛋白
• 原核表达
• 结构分析

为了研究新疆南疆分离的山羊痘病毒P32基因的特征,试验通过PCR扩增得到P32基因及其膜外区P321～282基因和膜外亲水区P3220～270基因,分别构建了表达载体(pET42b-P32、pET42b-P321～282和pET28a-P3220～270)并进行了原核表达,对其核苷酸序列的同源性、遗传进化关系及推测的氨基酸序列、蛋白质二级结构进行了预测分析。结果表明:山羊痘病毒南疆株P32基因发生了较大突变,相对对照在第100～105位增加了6个核苷酸,编码K、N两个氨基酸,全长达到975 bp,编码324个氨基酸,与Gansu 2009株相似。跨膜分析显示P32蛋白膜外区为1～282位氨基酸,跨膜区为283～305位氨基酸,膜内区为306～324位氨基酸。二级结构分析发现其分子两端呈明显的疏水结构,抗原性较弱,而中间区域有较强的亲水性和较强的抗原性。蛋白质表达发现其全长在大肠杆菌中几乎没有表达,其膜外区可以表达,但表达量较低,难以纯化。说明山羊痘病毒P32蛋白是一个典型的膜蛋白,全长较难表达纯化,南疆株P32蛋白也具有这样的特性。

• 单位
  塔里木大学; 动物科学学院; 新疆生产建设兵团