摘要
目的部分纯化伞枝犁头霉分泌的毒力因子,并研究其诱导人血管内皮细胞凋亡的机制。方法用Con A Lectin亲和层析法纯化伞枝犁头霉分泌的糖蛋白,并在流式细胞仪下检测不同蛋白成分对人血管内皮细胞凋亡的影响。用变性和非变性法去除伞枝犁头霉糖蛋白的糖基,并分别检测其蛋白和寡糖成分诱导凋亡的活性。Westernblot法分析伞枝犁头霉糖蛋白诱导人血管内皮细胞caspase激酶活化情况。用caspase抑制剂检测caspase-8和-9在凋亡反应中的作用。XTT法检测caspase抑制剂能否终止细胞存活率的抑制。结果流式细胞仪分析显示伞枝犁头霉分泌的总蛋白和糖蛋白能以剂量依赖的方式诱导人血管内皮细胞凋亡...
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单位四川省人民医院; 四川省医学科学院