气/质联用法检测反式花生四烯酸对糖尿病大鼠视网膜微血管的硝化应激损伤评价

作者：许琳; 寻国良; 姚祝军; 刘玉敏; 樊莹; 孙涛; 许迅

来源：中华实验眼科杂志, 2011, 29(5): 432-436.

DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2011.05.012

• 反式花生四烯酸
• 硝化应激
• 糖尿病视网膜病变
• 气/质联用
• 二氧化氮
• 自由基

背景 反式花生四烯酸(TAAs)是NO2·介导的花生四烯酸异构化的主要产物,是硝化应激的特异性脂质标志物.NO2·介导的损伤是缺血性视网膜病变可能的发病机制之一,先前的研究证实高糖可以引发硝化应激.目的 应用气/质联用(GC/MS)法检测TAAs水平以评价高糖引发的硝化应激对视网膜微血管的损害程度.方法 2周龄雄性SD大鼠100只随机分为模型组和正常对照组,应用链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性腹腔注射诱导糖尿病动物模型.应用改良合成法,花生四烯酸(AA)经环氧化及去氧化制得TAAs的标准品14E-AA.GC/MS检测造模后2、4、8、12、16周时血清中TAAs及AA的含量,选择离子79,计算峰面积之比.结果 50只大鼠成功建立糖尿病模型,其高血糖状态持续在实验期.14E-AA纯度达到97.3%,可作为标准品使用.糖尿病大鼠造模成功50只,每组10只,造模后2周、4周模型组大鼠血清中TAAs/AA(反式与)顺式之比与正常对照组相比差异无统计学意义(t=-0.376、t=-0.642,P>0.05);造模后8、12、16周糖尿病大鼠血清中TAAs/AA值为0.1042、0.1568和0.1895,明显高于对照组的0.0832、0.0910和0.1100,差异均有统计学意义(t=-36.409、t=-166.714、t=-148.212,P<0.05).结论糖尿病大鼠血清中TAAs/AA水平随病程的延长而增加,提示硝化应激对视网膜微血管的损伤程度与病程的长短有关.建立GC/MS检测TAAs体系可为缺血性微血管病变的研究提供新的评价指标.

• 单位
  生命有机化学国家重点实验室; 上海交通大学; 中国科学院上海有机化学研究所