miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用

作者：周超; 温天明^*; 胥丽; 刘杰; 邬昊; 李钊

来源：西部医学, 2021, 33(01): 10-15.

• 脓毒症
• 免疫抑制
• miR-140
• PD-L1

目的探讨miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用。方法取90只小鼠随机分成对照组(Control组)、脓毒症模型组(CLP组)和CLP+miR-140组,每组30只。盲肠结扎穿孔法(CLP法)建立小鼠脓毒症模型,尾静脉注射转染miR-140 agomir,记录30天生存率,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)表达,流式细胞术检测血清CD4+T和CD8+T细胞百分率,提取腹膜巨噬细胞,流式细胞术分析PD-L1阳性百分率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-140和PD-L1基因表达,蛋白印迹(Western blot)检测PD-L1蛋白表达,荧光素酶报告实验检测miR-140和PD-L1靶向作用关系。结果与control组相比,CLP组在1、7、14 d的TNF-α、IL-2水平升高(P<0.01),而TNF-α、IL-2水平呈时间依赖性降低(P<0.05);CLP组较control组小鼠生存率降低(P<0.01),CD4+和CD8+细胞百分比升高(P<0.01),巨噬细胞PD-L1阳性细胞率升高(P<0.01),miR-140表达水平降低(P<0.01),PD-L1基因和蛋白表达水平升高(P<0.01);与CLP组比较,CLP+miR-140组小鼠生存率升高(P<0.01),CD4+和CD8+细胞百分比升高(P<0.01),巨噬细胞PD-L1阳性细胞率下降(P<0.01),miR-140表达水平升高(P<0.01),PD-L1基因和蛋白表达水平降低(P<0.01);荧光素酶报告实验结果显示miR-140和PD-L1存在靶向作用关系。结论 miR-140可靶向作用于PD-L1,从而改善小鼠脓毒症引起的免疫抑制。

• 单位
  成都市第一人民医院; 重庆医科大学附属第二医院