摘要

目的构建pE_6R_4/p53/GFP重组质粒并检测其在人非小细胞肺癌H1299(p53—/—)细胞的辐射诱导表达。方法用嵌合型增强子E_6R_4取代pci-neo质粒的CMV增强子,将wt-p53cDNA全长序列、IRES_2-EGFP报告基因片段构建于嵌合型增强子E_6R_4下游,获得pE_6R_4/p53/GFP重组质粒,采用脂质体法将重组质粒转染人非小细胞肺癌H1299(p53—/—)细胞;采用RT-PCR方法鉴定wt-p53基因整合情况;Western-blot方法检测不同辐射剂量8mVX线照射后,被转染细胞中wt-p53蛋白表达水平和持续时间。结果酶切和测序鉴定pE_6R_4/p5...

  • 单位
    新桥医院