重组杆状病毒表达H9亚型禽流感HA基因的研究

作者:石霖; 熊永忠; 李晓楠; 赵晓彤; 顾贵波; 谷志大; 邓炜娜; 薛树山; 吴运谱; 王宏燕; 魏澍; 张雅为; 王竹; 曹东
来源:河南农业科学, 2014, 43(01): 120-126.
DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2014.01.003

摘要

为研究通过体外表达的方式获得具有生物学活性的禽流感HA蛋白的方法,根据GenBank公布的禽流感H9亚型的基因序列设计引物,扩增出HA基因全长片段,将扩增片段克隆到pFastBacHTa载体上,构建重组杆粒rBacmid-HA,在脂质体介导下转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,表达HA蛋白,并通过血凝抑制试验、Westernt-blot、间接免疫荧光试验研究其生物学活性。结果显示,在Sf9细胞中成功表达了HA蛋白,分子量约为65kD,且表达蛋白具有良好的生物学活性。

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