新型重组AAV5/5载体及包装系统

作者：董小岩; 田文洪; 袁振华; 谭淑萍; 吴小兵

来源：生物工程学报, 2010, (05): 679-686.

DOI：10.13345/j.cjb.2010.05.018

• 5型腺相关病毒(AAV5)
• I型单纯疱疹病毒(HSV1)
• 病毒载体
• 包装系统 Adeno-associated virus type 5 (AAV5)
• herpes simplex virus I
• virus vector
• production system

本研究组建了一种可用于规模化生产的以重组单纯疱疹病毒为辅助病毒的AAV5/5载体包装系统。首先,将5型腺相关病毒(AAV5)的rep和cap基因插入I型单纯疱疹病毒(HSV-1)基因组非必需基因UL2中,获得重组病毒rHSV1-rep5cap5。其次,构建一种携带AAV5ITR的通用型载体质粒pAAV5neo,将报告基因EGFP插入pAAV5neo中,得到pAAV5neo-EGFP质粒。将pAAV5neo-EGFP质粒导入BHK-21细胞,用G418选择培养,挑选出表达EGFP并在重组病毒rHSV1-rep5cap5感染下能高效产生rAAV5/5-EGFP的单克隆载体细胞株C020。用rHSV...

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 北京五加和分子医学研究所有限公司; 复旦大学; 生命科学学院; 遗传工程国家重点实验室