摘要

α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-arabinofuranosidase, EC 3. 2. 1. 55)是一种来源广泛的糖苷水解酶,在食品、饲料、医药和生物质能行业等领域具有良好的应用前景。本文利用基因重组技术克隆Aspergillus niger的1887 bp α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因,在毕赤酵母SMD1168中进行诱导表达获得α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶。实验结果表明,重组蛋白大小为85 kDa,纯化后其比活力为55.73 IU/mg;最适反应温度和pH分别为65 oC和5.0;金属离子Mn2+对该酶酶活有促进作用,而Cu2+对酶活有明显的抑制作用;以4-硝基苯酚-α-L-阿拉伯呋喃糖苷(pNPA)为底物时测得Km值和Vmax值分别为2.31 mmol/L和625 μmol/( mL·min);该酶对柑橘果汁具有显著澄清效果。本研究不仅丰富了α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶资源库,同时为后续探究α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶在果汁加工中的应用提供了参考。