川芎嗪对过氧化氢致大鼠视网膜神经节细胞氧化损伤的抑制作用及机制

作者：孙旋; 冯卓蕾; 陈娜^*

来源：眼科新进展, 2019, 39(06): 515-518.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2019.0118

• 川芎嗪
• 视网膜神经节细胞
• 超氧化物歧化酶
• 谷胱甘肽过氧化物酶
• 丙二醛

目的探讨川芎嗪对H2O2诱导的大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)氧化损伤的抑制作用及其机制。方法在DMEM培养基中培养RGC-5细胞。将细胞分成5组:正常对照组:不做任何处理;阴性对照组:用20 g·L-1川芎嗪孵育24 h;氧化损伤组:用100μmol·L-1的H2O2孵育24 h;川芎嗪低浓度组:用20 g·L-1川芎嗪孵育24 h后加入100μmol·L-1的H2O2孵育12 h;川芎嗪高浓度组:用40 g·L-1川芎嗪孵育24 h后加入100μmol·L-1的H2O2孵育12 h。通过MTT法测定细胞增殖情况,荧光标记法检测RGC-5细胞内活性氧含量,Hoechst-PI染色观察细胞凋亡情况,使用721D分光光度计测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果 MTT法测定结果显示,氧化损伤组RGC-5细胞活性明显下降(24.67%±2.90%),与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与氧化损伤组比较,川芎嗪低、高浓度组RGC-5细胞活性分别提高到51.33%±4.35%和60.00%±3.65%,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。荧光标记法显示,氧化损伤组DCF荧光信号明显增强,不同浓度川芎嗪干预后,荧光信号强度逐渐减弱。Hoechst-PI染色显示,氧化损伤组凋亡细胞数增多,甚至出现红染的坏死细胞,细胞凋亡率为66. 00%±2. 98%;川芎嗪干预后,凋亡及坏死细胞逐渐减少,川芎嗪低、高浓度组细胞凋亡率分别为52. 33%±4. 11%和46. 04%±3. 52%,两组细胞凋亡率与氧化损伤组比较差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。与阴性对照组比较,氧化损伤组RGC-5细胞内SOD、GSH-PX含量明显下降,MDA含量升高,差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。与氧化损伤组比较,川芎嗪高浓度组SOD、GSH-PX含量升高,MDA含量下降,差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。与氧化损伤组比较,川芎嗪低浓度组SOD与MDA含量变化不大(均为P> 0. 05),GSH-PX含量升高(P <0. 05)。结论川芎嗪通过改变RGC-5细胞内抗氧化酶表达发挥对氧化损伤的RGC的保护作用。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第一医院