18α-甘草次酸通过抗氧化作用促进成年小鼠室管膜下区神经干细胞增殖

作者：刘雪芹; 牛晓洁; 王必慧; 王婷玉; 杨静; 陆利^*

来源：解剖学报, 2022, 53(01): 11-18.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2022.01.002

• 18α-甘草次酸
• 神经干细胞
• 抗氧化
• 免疫印迹法
• 小鼠

目的探讨18α-甘草次酸(18α-GA)对成年小鼠室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖的影响及其机制。方法 100只6月龄BALB/c小鼠随机平均分为18α-GA组(腹腔注射18α-GA 40 mg/kg两个月,以DMSO为溶解介质)和DMSO对照组(腹腔注射含等体积DMSO溶解介质的PBS溶液),每组50只,其中15只用于在体实验,其余35只小鼠断头取脑,分离培养SVZ区NSCs。采用Ki-67染色、成球实验、BrdU掺入实验及CCK-8实验检测SVZ区NSCs增殖活力,二氢乙啶(DHE)染色等方法检测活性氧簇(ROS)及超氧化物歧化酶1(SOD1)水平,Real-time PCR及Western blotting检测SVZ区NSCs的核因子E2相关因子2 (Nrf2)表达。结果在体实验结果显示,腹腔注射18α-GA后,小鼠SVZ区Ki-67阳性细胞数较DMSO对照组明显增多,ROS水平较DMSO对照组明显下降,而SOD1在mRNA和蛋白水平均明显升高,分别是对照组的(3.17±0.073)倍和(2.12±0.02)倍(P<0.05和P<0.001)。细胞实验结果表明,18α-GA组小鼠SVZ区的NSCs成球速度快,数量多,其中直径在40～60μm和≥60μm的神经球数量分别是DMSO对照组的2.1倍和4倍(P<0.001);18α-GA组小鼠SVZ区的NSCs活力明显提高(P<0.001),BrdU阳性率是DMSO对照组的(1.75±0.17)倍(P<0.01); 18α-GA组小鼠SVZ区NSCs的ROS水平较DMSO对照组下降18.91%±4.33%(P<0.05),而SOD1在mRNA和蛋白水平均明显升高(P<0.05和P<0.01)。此外,腹腔注射18α-GA后小鼠SVZ区及其NSCs中Nrf2的mRNA和蛋白水平均高于对照组(P<0.01和P<0.05)。结论在体给予18α-GA可提高成年NSCs的SOD1活性,减少细胞内ROS堆积,维持和改善成年小鼠SVZ区NSCs的增殖潜能。

• 单位
  山西医科大学; 解剖学教研室