高良姜素对青光眼大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

作者：王海峰; 向晓欢; **赟; 李奕萍^*

来源：眼科新进展, 2023, 43(02): 105-110.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2023.0021

• 高良姜素
• 青光眼
• 大鼠
• 炎症
• 视网膜神经节细胞

目的 研究高良姜素对青光眼大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用。方法 取48只SD大鼠随机分为对照组、对照+高良姜素组、高眼压组和高眼压+高良姜素组，每组12只(12眼)。对照+高良姜素组和高眼压+高良姜素组大鼠接受高良姜素滴眼液治疗，对照组和高眼压组大鼠则接受相同剂量二甲基亚砜溶剂滴眼。于造模后第0～28天监测大鼠眼压，并于造模后第28天处死大鼠，收集各组大鼠右眼球，并采用HE染色观察大鼠视网膜形态变化，采用免疫组织化学染色分析各组大鼠视网膜中GFAP、Toll样受体4(TLR4)和NOD样受体3(NLRP3)表达。从4只4 d龄大鼠视网膜中分离RGC,分为空白组、光气组和CoCl2+高良姜素组。光气组和光气+高良姜素组RGC与200μmol·L-1 CoCl2一起孵育48 h,光气+高良姜素组RGC中加入20μmol·L-1高良姜素干预48 h。收集各组细胞，采用流式细胞术和Western blot检测RGC的凋亡率及相关蛋白的相对表达情况，并采用ELISA检测空白组、光气组和光气+高良姜素组RGC中IL-18和IL-1β蛋白表达。结果 造模后第3～28天，与对照组比较，高眼压组大鼠眼压均显著升高(均为P<0.001),高眼压+高良姜素组大鼠眼压差异均有统计学意义(均为P<0.05)。造模后第0～28天，对照组与对照+高良姜素组大鼠眼压差异均无统计学意义(均为P>0.05)。造模后第18～28天，与高眼压组比较，高眼压+高良姜素组大鼠眼压均持续显著降低(均为P<0.05)。对照组大鼠视网膜厚度、RGC生存率与对照+高良姜素组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05);与对照组比较，高眼压组大鼠视网膜厚度、RGC生存率均显著减少(均为P<0.01),高眼压+高良姜素组大鼠视网膜厚度、RGC生存率差异均无统计学意义(均为P>0.05);与高眼压组比较，高眼压+高良姜素组大鼠视网膜厚度、RGC生存率均显著增加(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示，与对照组比较，高眼压组大鼠视网膜组织中TLR4、NLRP3蛋白表达均显著上调(均为P<0.001),高眼压+高良姜素组大鼠视网膜组织中TLR4、NLRP3蛋白表达均显著降低(均为P<0.001),对照+高良姜素组大鼠视网膜组织中TLR4、NLRP3蛋白表达差异无统计学意义(均为P>0.05);与高眼压组比较，高眼压+高良姜素组大鼠视网膜组织中TLR4、NLRP3蛋白表达均显著降低(均为P<0.01)。在体外实验中，与空白组比较，光气组RGC中IL-18和IL-1β表达均显著增加(均为P<0.05);与光气组比较，光气+高良姜素组RGC中IL-18和IL-1β表达均显著减少(均为P<0.001);光气组RGC中TLR4、NLRP3蛋白表达较空白组均显著增加(均为P<0.001);且光气+高良姜素组RGC中TLR4、NLRP3蛋白表达较光气组均显著减少(均为P<0.01)。结论 高良姜素在青光眼模型中可降低眼压并防止RGC凋亡，其保护机制可能与抑制TLR4/NLRP3炎症小体激活有关。

• 单位
  绵阳市第三人民医院; 四川中医药高等专科学校