乙脑病毒为骨架的寨卡病毒减毒活疫苗的构建

作者：唐丽萍; 任阳; 陈岚; 李玥珂; 冯亚岚; 黄荣; 袁磊; 陈蓉; 杨健^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2023, 37(04).

• 乙型脑炎病毒
• 寨卡病毒
• 嵌合病毒
• 疫苗

目的构建乙脑/寨卡嵌合病毒(ChimZIKV)并评价其是否可成为寨卡候选疫苗株。方法用基因克隆技术将寨卡病毒prM/E基因替换乙脑病毒疫苗株相应区域, 构建乙脑寨卡嵌合病毒感染性克隆, 体外转录制备RNA, 电转染导入BHK-21细胞拯救获得ChimZIKV, 通过噬斑试验、免疫荧光、基因测序鉴定病毒;检测其生长特性;通过动物实验分别检测其小鼠脑内神经毒力、病毒血症、中和抗体产生能力及免疫保护效果。结果酶切和测序结果表明ChimZIKV感染性克隆成功构建, 病毒测序及免疫荧光证实嵌合病毒拯救成功;噬斑试验显示该嵌合病毒呈小噬斑;生长曲线显示其增殖速度慢于乙脑疫苗株;细胞增殖活性试验显示该嵌合病毒感染组细胞的增殖活性明显高于乙脑病毒疫苗株感染组;动物实验结果显示嵌合病毒对小鼠和乳鼠都表现出极低的神经毒力;病毒血症结果显示该嵌合病毒在小鼠体内没有检测到明显的病毒血症;噬斑减少中和试验显示免疫小鼠血清中和抗体的阳转率达100%, 第3周中和抗体效价最高(GMT=85);免疫保护试验显示对ChimZIKV(MR766)的脑内攻击保护率为30%。结论嵌合病毒ChimZIKV具有一定的免疫原性和较好的安全性, 有进一步发展为寨卡病毒候选疫苗株的可能。

• 单位
  川北医学院