益肺散结方对肺纤维化大鼠模型自噬及PI3K-AKT-mTOR通路的影响

作者：韩欣; 丁晓玲; 余涛; 包蕊; 王馨

来源：西部医学, 2021, 33(01): 38-43.

• 益肺散结方
• 肺纤维化
• 磷脂酰肌醇-3-激酶
• 蛋白激酶B
• 雷帕霉素靶分子信号通路

目的探讨益肺散结方对肺纤维化(PF)大鼠肺组织中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶分子(mTOR)信号通路及自噬的影响。方法选取SD大鼠50只,随机选10只行气管插管术并注入生理盐水0.3 mL作为对照组,其余40只大鼠行气管插管并注入博莱霉素(BLM)5 mg/kg,0.3 mL,制备PF模型,造模成功后,随机分为模型组(PF组)、益肺散结方低(7.5 g/kg)、中(15 g/kg)、高(30 g/kg)剂量组,每组各10只。对照组、PF组经灌胃给予生理盐水,益肺散结方各剂量组灌胃给予相应剂量药物1次/d,共给药21 d。末次给药12 h后,处死大鼠取肺组织;用苏木精-伊红染色(HE)观察肺组织病理形态;马松(Masson)染色法评估胶原增殖程度;羟脯氨酸试剂盒测定胶原蛋白含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织通路蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR及自噬相关蛋白beclin-1、泛素和LC3结合蛋白p62(p62)、ɑ-平滑肌动蛋白(ɑ-SMA)、微管相关蛋白轻链3(LC3-Ⅱ)/LC3-Ⅰ表达水平。结果与对照组相比,PF组大鼠肺组织炎性细胞浸润及炎性程度评分、胶原增殖程度及评分、胶原蛋白含量、通路蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR相对表达水平、自噬相关蛋白ɑ-SMA和p62均升高(均P<0.05),自噬相关蛋白beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均降低(均P<0.05)。与PF组相比,益肺散结方高、中、低剂量组大鼠肺组织炎性细胞浸润及炎性程度评分、胶原增殖程度及评分、胶原蛋白含量、通路蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR相对表达水平、自噬相关蛋白ɑ-SMA和p62均降低(均P<0.05),自噬相关蛋白beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均升高(均P<0.05)。结论益肺散结方可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路表达,提高肺组织细胞自噬活性,缓解肺纤维化进程。

• 单位
  青海省妇幼保健院