摘要

【目的】通过转录组开发棘胸蛙SSR和SNP分子标记,分析其遗传多样性,为棘胸蛙的遗传背景研究提供数据支撑。【方法】利用MISA软件对棘胸蛙(Quasipaa spinosa)转录组SSR进行检索并分析,利用Samtools和VarScan v.2.2.7软件进行SNP检索与分析。【结果】从棘胸蛙转录组中共筛选出33019个SSR位点,其中21966条序列含有SSR位点,6688条序列含有超过1个SSR位点,且在所发现的SSR位点中以单碱基重复(25788)和二碱基重复(4807)的数目最多。单碱基重复和二碱基重复的优势重复基元分别为A/T(83.88%)和AC/GT(38.15%);在检索到得33019个SSR位点中,重复次数主要集中在5~25次,同时大部分位点均位于非编码区,而仅有1633个SSR位点位于编码区;棘胸蛙SSR长度≥12 bp的位点达17244个,占所有SSR位点的58.53%。对棘胸蛙转录组序列进行SNP检索,共计发现87634个SNP位点,其中,56300个SNP位点属于转换位点,31334个位点属于颠换位点,转化/颠换达到1.80。挑选120条序列设计引物进行SSR位点验证,发现有57对引物扩增出单一条带,且条带大小与预期一致。【结论】采用高通量测序技术进行SSR和SNP标记具有较高的可行性,同时棘胸蛙具有中度偏高的遗传多样性。