VEGF189基因合成、原核表达及鉴定

作者：陈丹; 王宏; 朱中松; 向军俭; 杨琴; 赵鑫; 邓宁

来源：免疫学杂志, 2009, (04): 469-472.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20090125

• VEGF189
• SOEPCR
• 原核表达 VEGF189
• SOE PCR
• prokaryotic expression

目的获得编码VEGF189蛋白的基因,并通过原核表达系统表达VEGF189融合蛋白。方法应用SOE PCR技术合成VEGF189基因,克隆入pET-32a(+)原核表达载体,转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot检测,表达产物经HisTrapTMHP亲和柱层析纯化,测定蛋白浓度。结果DNA测序分析表明,合成的VEGF189基因与文献报道相一致。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的Trx-VEGF189融合蛋白,以包涵体和可溶2种形式存在。表达产物可被兔抗鼠VEGF多抗特异识别。经HisTrapTMHP亲和柱纯化,获得纯度达...

• 单位
  暨南大学; 广州铭康生物工程有限公司