人衰变加速因子在CHO细胞的表达及其衰变加速活性研究

作者：郭波; 郑萍; 马正伟; 许桂莲; 李华; 谢佩蓉; 吴玉章; 邹强

来源：第三军医大学学报, 2004, (07): 576-579.

• 补体
• 衰变加速因子
• CHO细胞
• 51Cr释放法

目的　获得稳定表达人衰变加速因子 (humandecay acceleratingactivity ,hDAF)的中国仓鼠卵巢 (Chineseham sterovary ,CHO)细胞系 ,观察在补体活化情况下 ,hDAF对异种细胞的保护作用。方法　构建真核表达载体DAF pcDNA3 .1,用脂质体转染法将其导入CHO细胞 ,有限稀释法筛选稳定表达hDAF的单细胞克隆 ,流式细胞仪检测hDAF的表达 ,C3沉积实验和51 Cr释放法测定其促补体衰变活性。结果　成功构建了真核表达载体DAF pcDNA3 .1,并获得了表达hDAF的单细胞克隆 ,表达hDAF的CHO能减少补体C3的沉积 ,减弱补体的杀伤作用。结论　获得在细胞膜上稳定表达具功能活性的hDAF的CHO克隆 ,为进一步研究其结构与功能的关系准备了条件。

• 单位
  第三军医大学西南医院