不同截短型癌基因AEG-1启动子活性分析

作者：代瑛; 龙敏; 张喆; 刘丽; 张惠中; 董轲

来源：现代肿瘤医学, 2016, 24(23): 3691-3696.

• AEG-1启动子
• C-Myc
• SP1
• NF-κB
• E2F

目的:分析不同截短型癌基因AEG-1启动子活性,证实与E6/E7表达相关的转录调控因子对AEG-1启动子活性的影响。方法:以宫颈癌He La细胞基因组DNA为模版,扩增AEG-1启动子全长序列(-2710/-491),并应用本实验室改造的启动子活性研究专用绿色荧光蛋白报告载体构建p GL3-basicEGFP/AEG-1质粒,通过转染He La细胞及血管内皮细胞ECV304检测启动子活性。同时,根据AEG-1启动子序列上与E6/E7作用相关的转录调控因子结合位点位置,设计不同截短型AEG-1启动子序列引物,应用p GL3-basic-EGFP载体构建不同截短型AEG-1启动子载体,并分别转染细胞检测启动子活性。结果:AEG-1启动子全长序列p GL3-basic-EGFP/AEG-1载体转染He La细胞可见明显绿色荧光蛋白表达,而在血管内皮细胞ECV304中表达为痕量。包含不同转录调控因子C-Myc、SP1、NF-κB、E2F结合位点的不同截短型AEG-1启动子载体在肿瘤细胞中有活性但存在差异。结论:AEG-1启动子为肿瘤特异性启动子,含有与E6/E7表达相关的转录调控因子NF-κB、E2F结合位点的启动子序列为影响AEG-1基因启动子活性的关键区域。

• 单位
  第四军医大学; 唐都医院