pIRES-p16ink4a-hRb1载体的构建及其对骨肉瘤细胞周期的调控

作者：廖翔; 杨述华; 邵增务; 李进; 刘勇; 熊晓芊

来源：华中科技大学学报(医学版), 2006, (2): 224-227,240.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2006.02.023

• p16ink4a基因
• hRb1基因
• 内部核糖体插入位点
• 细胞周期

目的应用内部核糖体插入位点(IRES)序列构建单启动子双顺反子穿梭载体pIRES-p16ink4a-hRb1并鉴定,观察其导入骨肉瘤细胞后对细胞周期的调控.方法利用基因工程技术,将p16ink4a与hRb1全长cDNA编码区依次亚克隆至pIRES载体中,质粒构建通过PCR、双酶切与测序鉴定;脂质体转染至p16ink4a表达缺失、hRb1表达阳性的骨肉瘤细胞株MG63,G418筛选获得抗性克隆,

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院