来源于Penicillium sp.C1的水产用中性植酸酶基因在毕赤酵母中的表达及性质研究

作者：李雅楠; 余利红; 陈新美; 杨浩萌; 黄火清^*

来源：生物技术通报, 2020, 36(02): 134-141.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0704

• 中性植酸酶
• 水产用酶
• 青霉
• 毕赤酵母

通过简并引物和TAIL-PCR技术从青霉Penicillium sp. C1菌株的基因组DNA中克隆得到一个新的植酸酶基因,命名为phyC1。其结构基因全长1 477 bp,5’端包含58 bp的内含子序列,该基因编码472个氨基酸和一个终止密码子,前23个氨基酸为信号肽。将PhyC1的成熟蛋白的编码基因在毕赤酵母菌GS115中高效分泌表达,重组蛋白经硫酸铵沉淀和阴离子交换柱和分子筛纯化后达到电泳纯。对其酶学性质分析表明:重组植酸酶PhyC1最适pH为6.5,在pH5.0-10.0的条件下具有较好的稳定性;重组植酸酶PhyC1最适温度为50℃。与现有商品植酸酶相比,PhyC1具有两个显著的特性,如低温条件下具有高活性,尤其是在低于20℃时;在中性pH 7.0条件下仍具有90%以上的相对酶活性,因此,植酸酶PhyC1的优良特性为其在水产行业的应用奠定基础。

• 单位
  中国农业科学院饲料研究所; 生命科学学院; 广州医科大学