华蟾素诱导AMPK磷酸化促进结直肠癌细胞免疫原性凋亡的抗肿瘤机制研究

作者：李慧霞; 尤伟波; 陈丽; 王建平; 邵初晓^*

来源：中国现代应用药学, 2021, 38(21): 2659-2664.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2021.21.006

• 华蟾素
• 免疫原性死亡
• 腺苷酸蛋白激酶
• 结直肠癌

目的探讨AMPK在华蟾素(cinobufagin,CBG)诱导结直肠癌HCT116细胞发生免疫原性死亡的作用。方法体外培养结直肠癌HCT116细胞,并将细胞分为对照组、CBG组、CBG+AMPK抑制剂组(抑制剂组)和CBG+AMPK siRNA干扰组(干扰组);用MTT法检测细胞增殖,LIVE/DEAD?Viability/Cytotoxicity Kit试剂盒观察细胞死亡情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡比例、钙网蛋白(calreticulin,CRT)含量,ELISA法检测培养基中HMGB1含量,Westernblotting方法检测AMPK、磷酸化的AMPK(p-AMPK)的表达水平。结果 2.5,5,10,25,50,100,250,500 nmol·L–1的CBG处理48 h后,细胞增殖抑制率显著增加,IC50为(53.03±5.36)nmol·L–1。25,50 nmol·L–1的CBG显著增加p-AMPK表达。与对照组比较,CBG组细胞凋亡比例、cleaved-caspase3表达、CRT和HMGB1含量增加,Bcl-2表达下降;与CBG组相比,抑制剂组和干扰组细胞凋亡比例、cleaved-caspase 3表达、CRT和HMGB1含量明显下降,Bcl-2表达增加。结论 CBG通过激活AMPK诱发免疫原性死亡,抑制结直肠癌细胞的增殖。

• 单位
  温州医科大学