重组腺相关病毒介导的大鼠脂联素载体的构建与鉴定

作者：李强翔; 钟惠菊; 盛杰; 李果; 张颖; 申道君; 王敏

来源：现代生物医学进展, 2008, (03): 430-432+444.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2008.03.003

• 基因
• 脂联素
• 腺相关病毒 gene
• Acrp30
• recombinantadeno-associated virus

目的:克隆大鼠脂联素基因(Acrp30),并对载有脂联素的重组腺相关病毒(AAV)载体进行构建及鉴定。方法:根据Acrp30的基因序列设计引物,上游引入EcoRⅠ位点,下游引入SalⅠ位点,以EX-A0242-M01-Acrp30为模板扩增目的基因。将Acrp30基因克隆入pUC19载体中,获得重组质粒pUC19-Acrp30。然后用EcoRⅠ与SalⅠ酶切pUC19-Acrp30及质粒pSNAV,回收酶切片段,T4DNA连接酶16℃过夜,转化大肠杆菌DH5α感受肽细胞,筛选阳性克隆获得pSNAV-Acrp30,EcoRⅠ/Sal双酶切鉴定,并行全基因测序。结果:PCR电泳及酶切鉴定表明,pS...

• 单位
  娄底市中心医院; 中南大学湘雅医院