云南松胚乳DNA提取与ISSR-PCR反应体系的建立

作者：刘娜; 王昌命; 普晓兰

来源：西南林学院学报, 2009, 29(02): 27-30.

• 云南松
• 胚乳DNA提取
• ISSR分子标记 Pinus yunnanensis
• endosperm DNA extraction
• ISSR molecular markers

以云南松胚乳为试验材料,用改进的SDS法进行DNA的提取,并对其纯度、浓度及产率进行检测,结果表明:DNA扩增效果良好,完全能满足进一步试验的需要;采用单因子试验分析法分别研究模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、退火温度对反应体系的影响,建立并优化云南松ISSR-PCR 20μL反应体系:buffer(10 mmol/L Tris-HCl,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100 pH 9.0),0.3μmol/L引物,1.5 m mol/L MgCl2,0.5 U TaqDNA聚合酶,0.2 mmol/L dNTPs,30 ng模...

• 单位
  西南林学院