3种沙门氏菌RPA检测方法的建立

作者:黄国梁; 王倩玉; 蔺国珍*; 马继; 李倩倩; 陈士恩; 李琪; 苏超
来源:黑龙江畜牧兽医, 2022, (17): 79-84.
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.11.0173

摘要

为了建立针对鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimu-rium)和肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)方法,试验对RPA体系的反应时间和温度进行优化,并比较分析了RPA、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)和实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitativepolymerase chain reaction, qPCR)三种检测方法的特异性及敏感性。结果表明:RPA体系的最佳反应时间为30 min,最佳反应温度为37℃。RPA、PCR、qPCR三种检测方法对检测鸡白痢沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌均具有良好的特异性,敏感性分别达到1×101copies/μL、1×102copies/μL和1×100copies/μL。说明建立的针对3种沙门氏菌的RPA检测方法操作简单便捷,敏感性较好。

全文