猪卵泡抑素基因成熟肽序列的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：刘玉鹏; 陈瑞爱; 李超; 施振旦

来源：中国畜牧兽医, 2013, (11): 12-15.

• 卵泡抑素
• 成熟肽序列
• 克隆
• 表达 follistatin
• mature peptide sequence
• cloning
• expression

根据猪卵泡抑素(follistatin,FS)基因编码区序列(GenBank登录号:M36512.1)设计并合成1对引物,经PCR扩增获得了FS基因成熟肽序列,将其克隆入pMD18-T载体并转化E.coli DH5α感受态细胞,进行PCR、双酶切及测序验证。然后将其克隆到表达载体pRSET-A的BamHⅠ和HindⅢ酶切位点之间,构建重组质粒pR-FS并转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,再经PCR、双酶切和测序验证。转化重组质粒pR-FS的重组菌经IPTG诱导后的表达产物进行SDS-PAGE分析,分子质量与预期相符,为26.1ku左右,经0.2mmol/L IPTG诱导3h之后表...

• 单位
  华南农业大学; 肇庆大华农生物药品有限公司; 江苏省农业科学院