洋甘菊活性组分对LPS诱导人支气管上皮细胞的保护作用及机制研究

作者：娜迪热·艾尔肯; 彭军; 范芳芳; 李茜^*

来源：药学研究, 2023, 42(05): 298-309.

DOI：10.13506/j.cnki.jpr.2023.05.002

• 洋甘菊活性组分
• 哮喘
• 人支气管上皮细胞
• Kif3a
• SHH信号通路

目的 基于驱动蛋白家族3A基因(Kif3a)和Sonic hedgehog(SHH)信号通路探讨洋甘菊活性组分对脂多糖(LPS)诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)的保护作用及机制。方法 用脂多糖诱导人支气管上皮细胞建立哮喘炎症细胞模型。CCK-8法检测不同浓度洋甘菊活性组分对脂多糖诱导人支气管上皮细胞的增殖的抑制作用，筛选出最佳洋甘菊活性组分给药浓度。将细胞分为空白对照组、脂多糖模型组、阳性药物组(1μmol·L-1地塞米松干预2 h)、洋甘菊活性组分组(200μg·mL-1,48 h)。Annexin V/PI结合流式细胞术检测各组的凋亡率。实时荧光PCR法和Western blot法检测Kif3a、SHH、Ptch1和Gli1的mRNA和蛋白表达变化。结果 脂多糖干预后，可显著降低人支气管上皮细胞活力(P<0.05),并诱导其细胞凋亡(P<0.01)。洋甘菊活性组分在浓度200μg·mL-1处理48 h时，可以显著逆转脂多糖对细胞的损伤并促进增殖(P<0.01),减弱脂多糖诱导的细胞凋亡(P<0.01)。与空白对照组比较，脂多糖诱导的人支气管上皮细胞内Kif3a在mRNA水平和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),SHH、Ptch1、Gli1在mRNA水平和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与脂多糖模型组相比较，洋甘菊活性组分处理后可显著逆转mRNA水平和蛋白表达(P<0.05),增加Kif3a的mRNA水平和蛋白表达水平，并降低SHH、Ptch1、Gli1的mRNA水平和蛋白表达(P<0.05)。结论 脂多糖诱导人支气管上皮细胞损伤，下调Kif3a水平从而上调SHH、Ptch1、Gli1水平，调控SHH信号通路处于异常激活状态。洋甘菊活性组分可显著逆转脂多糖诱导的细胞炎症损伤，上调Kif3a水平，下调SHH、Ptch1、Gli1水平，通过Kif3a调控SHH信号通路，对脂多糖诱导的人支气管上皮细胞发挥保护作用，改善哮喘气道炎症。

• 单位
  新疆理化技术研究所; 新疆医科大学