长链非编码RNA CARMN通过下调RAD51提高三阴性乳腺癌对多柔比星的敏感性

作者：廖晗; 罗琨; 喻远航; 张悦; 解荣; 张波^*

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(09).

• 长链非编码RNA
• 三阴性乳腺癌
• 多柔比星
• 药物敏感性

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) CARMN对三阴性乳腺癌多柔比星敏感性的影响及可能作用机制。方法瞬时转染CARMN过表达质粒后, 通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测多柔比星对乳腺癌的抑制率。通过StarBase数据库预测CARMN可能下游分子, 并筛选RAD51作为下游靶基因。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及免疫印迹法对CARMN在乳腺癌细胞系的表达量、CARMN过表达质粒的转染效率和RAD51的mRNA及蛋白表达改变进行检测, 探讨CARMN影响三阴性乳腺癌对多柔比星敏感性的可能机制。配对样本采用配对t检验。结果 CARMN在三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231、BT-549、BT-20、MDA-MB-468中较正常乳腺上皮细胞系MCF-10A表达下降(分别为0.032±0.005、0.524±0.044、0.367±0.783、47.448±6.929)。体外药物敏感性研究显示CARMN可以提高癌细胞对多柔比星的敏感性:在MDA-MB-231和BT-549细胞系中, 过表达组多柔比星的抑制率均低于阴性对照组(t=-9.042、-10.217, P<0.05);药物作用72 h时过表达组的半数抑制浓度(IC50)均低于对照组(MDA-MB-231:1.43 μmol/L比2.32 μmol/L;BT-549:228.00 nmol/L比375.78 nmol/L, t=-3.402、-3.624, P<0.05)。RAD51在CARMN过表达组的mRNA[MDA-MB-231 (25.59±1.52比77.19±7.08)、BT-549 (4.54±0.52比77.03±10.96)]和蛋白水平均明显下降(t=-12.352、-8.864, P<0.05)。结论 lncRNA CARMN可提高三阴性乳腺癌对多柔比星的敏感性, 可能通过抑制DNA损伤修复相关因子RAD51的表达来实现。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 上海交通大学医学院附属仁济医院