猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2～4特异siRNA的筛选及其抑制病毒复制效果的研究

作者：贺云霞; 华荣虹; 周艳君; 安同庆; 仇华吉; 王云峰; 童光志

来源：生物工程学报, 2007, (05): 794-800.

DOI：10.13345/j.cjb.2007.05.032

• RNA干扰
• 小干扰RNA
• 短发夹RNA
• PRRSV RNA interference
• small interference RNA
• short hairpin RNA
• PRRSV

RNA干扰(RNAi)技术是基因功能研究的有效工具,为了了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)次要结构蛋白GP2、GP3、GP4在病毒复制中的作用,针对各自的编码基因ORF2、ORF3、ORF4分别选取4个小干扰RNA(siRNA)位点(共12个),构建相应的短发夹RNA(shRNA)表达载体,转染MARC-145细胞后,通过荧光定量PCR和病毒滴度检测干扰效果。筛选了可以减少GP2、GP3、GP4相应基因mRNA含量的ORF2、ORF3、ORF4特异shRNA表达载体,病毒效价滴定表明shRNA表达载体处理细胞可以减少GP2、GP3、GP4相应基因mRNA含量,细胞培养上清中的病毒滴度比对...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室