miR-573调控神经导向因子4促进肺癌细胞上皮间质转化

作者：肖磊; 许丹媛; 段林立; 何梦璋^*

来源：现代肿瘤医学, 2023, 31(12): 2228-2234.

• miR-573
• 神经导向因子4
• 肺癌
• 上皮间质转化

目的:探讨miR-573通过调控神经导向因子4(NTN4)对肺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人肺癌组织和细胞系中miR-573和NTN4 mRNA水平。采用Lipofectamine 2000转染试剂对肺癌A549细胞进行转染并分组为Control组(不转染)、NC inhibitor组(转染NC inhibitor)、miR-573 inhibitor组(转染miR-573 inhibitor)、miR-573 inhibitor+si-NC组(转染miR-573 inhibitor和si-NC)和miR-573 inhibitor+si-NTN4组(转染miR-573 inhibitor和si-NTN4)。qRT-PCR检测miR-573表达水平；划痕法检测迁移能力；Transwell法检测侵袭、迁移能力；蛋白免疫印迹(Western blot)法检测NTN4及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达水平；双荧光素酶实验验证miR-573和NTN4的靶向关系。结果:肺癌组织和细胞系中miR-573表达明显升高，NTN4 mRNA表达明显降低(P<0.05),选择miR-573表达最高的A549细胞进行转染实验。与Control组或NC inhibitor组相比，miR-573 inhibitor组A549细胞中miR-573相对表达量、N-cadherin和Vimentin蛋白水平明显下降，划痕愈合率明显降低，迁移、侵袭细胞数明显减少，E-cadherin蛋白水平显著上升(P<0.05)。miR-573负向调控NTN4表达(P<0.05)。转染si-NTN4可逆转miR-573 inhibitor对A549细胞迁移、侵袭、EMT的抑制作用(P<0.05)。结论:miR-573靶向负调控NTN4表达，促进肺癌细胞的迁移、侵袭和EMT。

• 单位
  广州医科大学附属第二医院