摘要
目的研究温石棉对人胸膜间皮细胞MeT-5A细胞毒性与诱导细胞恶性转化的能力。方法于2016年6月, 采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测温石棉对MeT-5A细胞的细胞毒性;以5 μg/cm2温石棉间断染毒MeT-5A细胞, 24 h/次, 每周一次, 共28次, 待细胞呈现锚着不依赖性生长后, 用软琼脂集落形成试验判断细胞恶性转化, 并计算软琼脂集落形成率, 紫外比色法测定糖代谢过程中的关键限速酶活性, 包括丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)和己糖激酶(HK)。结果温石棉对MeT-5A细胞具有细胞毒性, 细胞相对存活率呈浓度依赖性下降。与未染毒时相比, 10、20、40、80 μg/cm2温石棉染毒后MeT-5A细胞相对存活率显著下降(P<0.05)。染毒28次后, 温石棉转化组细胞生长速度加快、排列紊乱, 失去接触抑制, 出现叠层生长, 并可在软琼脂上生长, 细胞集落形成率为18.33‰±2.49‰, 与对照组(0)比较, 差异有统计学意义(P<0.01);温石棉转化组细胞PK[(19.51±1.52)U/L]、PFK[(0.12±0.02)U/104个细胞]和HK[(0.26±0.01)U/104个细胞]酶活性水平高于对照组细胞[(25.00±1.04)U/L、(0.15±0.01)U/104个细胞和(0.33±0.01)U/104个细胞](P<0.01)。结论温石棉可诱导MeT-5A细胞发生恶性转化, 并升高细胞糖酵解相关激酶PK、PFK、HK酶活性水平。
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单位公共卫生学院; 浙江省医学科学院; 杭州医学院