兔出血症病毒蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

作者：单丽玲; 刘家森; 姜骞; 陈淑慧; 黄艳秋; 郭东春; 刘大飞; 曲连东

来源：黑龙江畜牧兽医, 2014, (23): 21-24+258.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2014.1400

• 兔出血症病毒(RHDV)
• 酵母双杂交
• 诱饵载体
• 自激活作用
• 毒性作用 rabbit hemorrhagic disease virus(RHDV)
• yeast two-hybrid
• bait vector
• self-activating action
• toxic action

为了研究兔出血症病毒(RHDV)蛋白与宿主蛋白的相互作用,试验采用RT-PCR技术从病毒基因组中扩增病毒的7种非结构蛋白P16、P23、2C-like protein、P29、VPg、3C-like protease、RNA复制酶(RdRp)及小结构蛋白VP10、主要结构蛋白VP60,测序正确后,定向克隆至p GBKT7载体,经转化酵母菌AH109验证诱饵载体p GBKT7-X的自激活活性和毒性作用。结果表明:诱饵载体p GBKT7-X对酵母细胞无毒性作用,且对报告基因无自激活现象。说明构建的诱饵载体可以用于酵母双杂交系统筛选与RHDV相互作用的宿主蛋白。

• 单位
  动物科技学院; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 黑龙江八一农垦大学