摘要

目的 小核仁RNA宿主基因(SNHG)14对H2O2诱导的人脑微血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响及作用机制。方法 体外培养人脑微血管内皮细胞BB19,100μmol/L H2O2诱导分别作用于转染SNHG14小干扰RNA、miR-181b模拟物及共转染SNHG14小干扰RNA与miR-181b抑制剂的BB19细胞后,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中SNHG14和miR-181b mRNA表达,CCK-8和流式细胞仪分别检测细胞增殖、凋亡,Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平。双荧光素酶报告实验验证SNHG14与miR-181b调控关系。结果 干扰SNHG14表达或过表达miR-181b后,H2O2诱导的BB19细胞增殖活性、Bcl-2表达及SOD和CAT活性明显升高,细胞凋亡率、Bax表达和MDA水平明显降低(P<0.05)。SNHG14靶向负调控miR-181b表达。而与仅干扰SNHG14表达的细胞比较,同时干扰miR-181b和SNHG14表达的BB19细胞经H2O2诱导后增殖活性、Bcl-2表达及SOD和CAT活性明显降低,细胞凋亡率、Bax表达和MDA水平明显升高(P<0.05)。结论 干扰SNHG14表达可能靶向负调控miR-181b抑制H2O2诱导的人脑微血管内皮细胞凋亡和氧化应激。

  • 单位
    神经内科; 沧州市中心医院