唑来膦酸/白介素-2诱导的中国恒河猴外周血γδT细胞体外扩增

作者：龚睿; 周艳; 郭晓萍; 郭铭; 刘金彪; 庄柯; 张晶; 周立^*

来源：武汉大学学报(理学版), 2020, 66(01): 81-86.

DOI：10.14188/j.1671-8836.2018.0148

• 恒河猴
• γδT细胞
• 唑来膦酸
• 免疫激活

建立了一种培养及大量扩增中国恒河猴外周血γδT细胞的方法。采用Ficoll密度梯度离心法分离中国恒河猴(rhesus macaque)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用含5%猴自体血清、1 000 U·mL-1白介素-2(IL-2)和不同浓度唑来膦酸(1,5,10μmol·L-1)的OpTmizer细胞培养基进行培养,并使用流式细胞仪进行纯度及表型分析。结果显示:使用含不同浓度唑来膦酸培养基诱导第8 d时,1μmol·L-1和5μmol·L-1处理组的猴γδT细胞分别扩增至总细胞的91. 4%和93. 1%;5μmol·L-1处理组表达CD56、CD69及HLA-DR蛋白的猴γδT细胞占总细胞的比例分别为75. 6%、75. 5%以及78. 0%;5μmol·L-1处理组表达干扰素IFN-γ的猴γδT细胞比例为84. 8%。本研究通过优化培养基的组成成分,仅添加猴自体血清和IL-2即能有效诱导猴γδT细胞在体外的大量扩增,且培养得到的猴γδT细胞能够显著表达CD56、CD69、HLADR及IFN-γ,并具有较强的免疫激活和细胞杀伤作用。

• 单位
  病毒学国家重点实验室; 武汉大学