谷氨酰胺转氨酶活化蛋白酶在大肠杆菌中的表达及性质研究

作者：高慧; 刘松^*

来源：食品与发酵工业, 2020, 46(15): 1-7.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023938

• 谷氨酰胺转氨酶
• 活化蛋白酶
• 大肠杆菌
• 表达优化
• 酶学性质

茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase,TGase)活化蛋白酶(activating metalloprotease,TAMEP)能够专一性切割TGase的酶原区,其高效制备对于重组TGase的生产有重要意义。将S.mobaraensis来源的TAMEP成功表达于大肠杆菌。通过对信号肽类型、信号肽N端密码子及诱导表达条件的优化,使胞外TAMEP酶活力达到186.3 U/mL。酶学性质分析显示,重组TAMEP的最适反应温度和最适反应pH分别为55℃和7.0; TAMEP在30～50℃孵育60 min酶活力保持在50%以上,且在pH 6.2～8.9较稳定; 0.133μmol/L重组TAMEP能够在30 min内使6.91μmol/L TGase基本活化。研究结果为TAMEP规模化制备提供了生产菌株和基础数据。

• 单位
  江南大学; 生物工程学院