乳铁蛋白对骨关节炎软骨细胞增殖活力及细胞外调节蛋白激酶表达的影响

作者：涂意辉; 薛华明; 夏志道; 马童; 刘晓东; 杜靖远

来源：中华实验外科杂志, 2012, (07): 1242-1244+1423.

• 乳铁蛋白
• 软骨细胞
• 增殖
• 细胞外调节蛋白激酶

目的观察人乳铁蛋白(hLF)对人骨关节炎软骨细胞(HACs)增殖活力及细胞外调节蛋白激酶(ERK)基因表达的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测HACs的增殖力,并选择hLF最佳工作浓度;LIVE/DEAD染色检测HACs的活力;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和免疫细胞化学染色检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)/ERK的表达。结果 MTT检测显示hLF对HACs的增殖促进作用呈剂量-效应关系(P<0.05),以200 mg/L为最佳药物浓度。LIVE/DEAD染色显示hLF可以显著促进HACs的活力,与空白对照组和无血清培养组比较,差异有统计学意义[(98.53±2.76)%比(89.12±6.98)%比(65.37±2.08)%,P<0.05]。Real-time PCR检测显示,hLF作用48 h后ERK mRNA相对表达量为(1.589±0.113),与对照组(1.024±0.026)比较差异有统计学意义(P<0.05)。IN Cell Analyzer2000定量检测,hLF能够显著促进p-ERK/ERK蛋白的表达,较对照组明显增高,差异有统计学意义[(0 887±0.003)比(0.637±0.002),P<0.05]。结论 hLF可明显促进HACs增殖力和活力,其作用机制可能与上调增殖基因p-ERK/ERK表达有关。

• 单位
  上海市杨浦区中心医院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院