摘要
通过对中国家鹅血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)基因进行克隆、表达、序列信息分析以及对中国家鹅SARS-CoV-2易感性进行分析,旨在为鹅ACE2方面的研究提供基础资料。以中国家鹅为研究对象,检测其不同组织的ACE2基因表达,并扩增出肾组织的ACE2全基因编码区序列。将ACE2目的基因与pMD-19T重组后导入DH5α感受态细胞,随机挑取单菌落进行菌液PCR和酶切验证,并对验证为阳性的单菌落进行测序。对测序所得序列进行生物信息学分析,同时对鹅与人及其他动物ACE2结合SARS-CoV-2的氨基酸序列进行了差异性比较。结果显示,鹅体内有ACE2表达,并在肾脏中有较高的表达水平;扩增出该鹅的ACE2基因ORF序列长度为2 473 bp,编码808个氨基酸,氨基酸序列与中国麻鸭的同源性最高,且处在同一进化分支中;进一步对ACE2编码蛋白质分析显示,该中国家鹅ACE2蛋白有较高亲水性,为Ⅰ型跨膜蛋白,信号肽位于第1~17氨基酸之间;此外,对鹅与人及其他动物ACE2的SARS-CoV-2结合关键氨基酸序列的比较显示,鹅与人等对SARS-CoV-2易感性较高动物的该序列差异较大,而与鸡、鸭等禽类较接近,提示鹅对SARS-CoV-2无易感性。研究获得了鹅ACE2基因与蛋白的相关资料,为鹅ACE2相关研究提供了基础理论依据和资料。
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单位农业部; 南京农业大学