亚胺培南对携带blaNDM-1耐药基因的Escherichia coli耐药性及内膜secY、secE和secG转录水平的影响

作者：吴兆猛; 赵琼; 吴玲玲; 王祖华; 余春芳; 金志雄^*

来源：中国抗生素杂志, 2023, 48(09): 1048-1056.

DOI：10.13461/j.cnki.cja.007471

• 亚胺培南
• 暴露
• Escherichia coli
• NDM-1
• SecYEG

目的 探讨亚胺培南(IPM)对blaNDM-1阳性Escherichia coli耐药性及其内膜secY、secE和secG转录水平的影响。方法以重组质粒pET28a(+)-blaNDM-1转化菌株E. coli DH5α-blaNDM-1和E. coli BL21(DE3)-blaNDM-1为研究对象，在梯度浓度增加或撤消IPM暴露下传代培养菌株，检测17种抗生素对IPM暴露菌株的MIC值；SDS-PAGE凝胶电泳检测NDM-1表达；蛋白活性实验检测NDM-1活性；qRT-PCR检测blaNDM-1及内膜secY、secE和secG转录水平。结果 12μg/mL和020μg/mL IPM暴露的E. coli DH5α-blaNDM-1菌株CFZ、CXM、FOX、CRO、CAZ、FEP等头孢类药物的MIC值(≥8μg/mL/≥8μg/mL、≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥64μg/mL/=32μg/mL、≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥32μg/mL/=8μg/mL)与0μg/mL IPM暴露MIC值(≤2μg/mL、=16μg/mL、≤8μg/mL、≤1μg/mL、≤4μg/mL、≤2μg/mL)相比均显著增高，而IPM和MEM的MIC值与0μg/mL IPM暴露(≤1μg/mL和≤1μg/mL)相比也显著增高(=8μg/mL/=8μg/mL和=4μg/mL/=4μg/mL)。12μg/mL和020μg/mL IPM暴露的E. coli BL21(DE3)-blaNDM-1菌株FOX、CRO、FEP等头孢类药物的MIC值(≥32μg/mL/≥32μg/mL、≥64μg/mL/≥64μg/mL、=16μg/mL/=16μg/mL)与0μg/mL IPM暴露(≤8μg/mL、≤1μg/mL、≤2μg/mL)相比也均显著增高，而IPM和MEM的MIC值与0μg/mL IPM暴露(≤1μg/mL和≤1μg/mL)相比也均显著增高(≥16μg/mL/≥16μg/mL和≥16μg/mL/≥16μg/mL)。SDS-PAGE显示，随12μg/mL IPM暴露时间的延长，菌株NDM-1水解IPM活性增加。qRT-PCR显示，12μg/mL IPM暴露的E. coli DH5α-blaNDM-1和E. coli BL21(DE3)-blaNDM-1的blaNDM-1、secY、secE和secG转录水平分别上调2.31/2.5、3.05/1.96、2.83/1.24和2.71/1.45倍。结论 IPM可使blaNDM-1阳性E. coli由碳青霉烯类敏感变为耐药且保持稳定，细菌内膜SecYEG跨膜通道蛋白参与菌株耐药性调控，这为认识抗生素压力下肠杆菌科细菌耐药性变化及指导临床合理用药提供理论支撑。

• 单位
  湖北医药学院附属太和医院; 湖北医药学院