骨桥蛋白基因在黔北麻羊性腺轴中的表达及其对颗粒细胞中繁殖相关基因的影响

作者：赵佳福^*; 周明帅; 杨秀远; 徐畅

来源：基因组学与应用生物学, 2023, 42(03): 285-294.

DOI：10.13417/j.gab.042.000285

• 黔北麻羊
• 骨桥蛋白基因
• 生物信息学分析
• 卵巢颗粒细胞
• 繁殖相关基因

本研究的目的是探究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因与黔北麻羊(Capra hircus)繁殖性状间的关系。本研究通过ProtParam和NetPhos等生物在线软件对黔北麻羊OPN的理化性质和结构功能进行分析，克隆OPN基因，构建OPN基因的真核表达载体。运用实时定量PCR法检测OPN基因在单羔、多羔黔北麻羊的垂体、下丘脑、子宫、卵巢和输卵管中的表达情况。随后，将OPN基因的真核表达载体转染至卵巢颗粒细胞中，检测过表达OPN基因对繁殖相关基因骨形态发生蛋白15 (bone morphogenetic protein 15,BMP15)、骨形态发生蛋白受体1B (bone morphogenetic protein receptor 1B,BMPR-1B)和促卵泡激素β亚基(follicle stimulating hormone β-subunit,FSHβ)表达量的影响。生物信息学分析结果表明，OPN是一种具有磷酸化位点的不稳定亲水性蛋白质，其蛋白质分子的质量为31 115.11 Da,理论等电点为4.39,化学式为C1309H2046N368O501S5,共编码279个氨基酸，其中携带的正电荷残基总数(Arg+Lys)为28个，负电荷残基总数(Asp+Glu)为66个。与其他动物相比，黔北麻羊OPN基因与反刍动物绵羊和牛的同源性较高，遗传距离较近。实时定量PCR结果表明，OPN基因在多羔组黔北麻羊的垂体、下丘脑、卵巢中的表达量极显著高于单羔组的(P<0.01),且过表达OPN基因后，极显著上调了繁殖相关基因BMP15的表达(P<0.01)。以上结果说明，OPN基因的表达量与黔北麻羊繁殖率呈正相关关系，可作为影响黔北麻羊繁殖力的多羔候选基因进行深入研究。

• 单位
  贵州大学; 动物科学学院