基于RNA-Seq技术探讨青藤碱干预膝骨关节炎大鼠的作用机制

作者：马阿雪; 寇久社^*; 鲁晓红

来源：中国中西医结合杂志, 2023, 1-7.

• 青藤碱
• 膝骨关节炎
• 转录组测序
• C-C基序趋化因子配体
• 中药单体

目的 观察青藤碱对于碘乙酸钠诱导的膝骨关节炎（KOA）大鼠关节软骨的转录组影响。方法 按随机数表法将30只SD大鼠分为空白（CK）组、模型（M）组和治疗（T）组3组，每组10只。M、T组大鼠右下肢关节腔内单次注射碘乙酸钠（1 mg/50μL生理盐水）建立KOA模型，注射后每周测量全部大鼠右下肢膝关节直径。造模21天后T组开始注射青藤碱（60 mg/kg），每天1次，连续10天。末次给药后8 h，对3组大鼠进行取材，麻醉后剖开大鼠右下肢关节，取下一部分关节后固定脱钙进行组织病理学分析；一部分关节软骨进行总RNA提取后测序，检测3组大鼠软骨组织中转录组基因表达情况，再对测序数据进行分析，包括差异基因表达分析、基因本体论联合会建立的数据库（GO）功能富集分析以及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果 青藤碱干预能够使大鼠膝关节直径减小（P<0.05），减轻关节软骨的损伤，降低Mankin’s评分（P<0.05）;3组大鼠共有24个具有显著性差异的基因，显著富集于GO功能分类中的单核细胞趋化、CCR趋化因子受体结合和KEGG富集的细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路等，其中主要作用的靶点基因为C-C基序趋化因子配体（CCL）4、CCL9、Prkag3等。结论 青藤碱可通过多途径、多靶点对KOA发挥疗效，关键靶点CCL4、CCL9、Prkag3及其相关的信号通路可能是青藤碱干预KOA的主要作用机制。

• 单位
  陕西中医药大学附属医院; 第二临床医学院; 陕西中医药大学第二附属医院; 陕西中医药大学