摘要
目的观察Neurogenesin1(Ng1)基因对大鼠脊髓损伤后功能恢复的影响,并初步探讨其可能机制。方法4月龄SPF级SD大鼠36只,体重约230g,雌雄不限,随机分为实验组和对照组(n=18)。采用改良Allen法制备大鼠T10脊髓损伤模型,通过Alzet微渗透压泵分别向实验组和对照组持续转染重组Ng1质粒和空白质粒各5μg。术后1d及1、2、3、4周采用BBB运动功能评分系统检测大鼠运动功能恢复情况;术后1周分别采用RT-PCR和Western blot方法检测Ng1mRNA及蛋白的表达;并于术后2、4周采用免疫荧光双标染色和组织学观察Ng1基因对内源性神经干细胞增殖的影响以及脊髓组织病理变化情况。结果自术后1周起实验组BBB评分明显高于对照组(P<0.05);术后4周实验组运动功能评分为(16.80±1.79)分,对照组为(9.60±1.67)分,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR和Western blot方法检测显示实验组大鼠脊髓组织均见Ng1mRNA与蛋白的表达,对照组无表达。组织学观察示实验组脊髓结构以及神经元形态恢复较好且逐渐趋于正常,且免疫荧光双标染色示实验组脊髓组织中新增殖的神经干细胞数较对照组明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ng1基因能够诱导脊髓损伤后内源性神经干细胞大量增殖,保护受损伤神经元,促进脊髓运动功能修复。
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