幽门螺杆菌vacA基因重组表达的包涵体复性及ELISA方法的建立

作者：党双锁; 王宏仓; 贾晓黎; 袁利超; 王宝峰; 张欣; 张正国; 程延安

来源：世界华人消化杂志, 2005, (20): 2500-2503.

• 幽门螺杆菌
• vacA基因
• 包涵体
• 变性
• 复性

目的:通过对vacA重组工程菌表达产物包涵体的变性、复性,提高表达产物的生物学活性,建立ELISA方法,讨论VacA抗原规模生产的可行性.方法:利用已经构建的表达VacA抗原的工程菌,用IPTG诱导,表达的包涵体通过系列条件的变性、复性、透析,并经活性鉴定.所制抗原用以包被ELISA板,建立ELISA方法并确定抗原的生物学活性.结果:重组工程菌可表达Mr3300的目的蛋白,表达形式为包涵体,条件优化后的包涵体经SDS-PAGE显示纯度达95%以上,活性经ELISA法测定正常人126例和blot电泳测定结果符合率为97.1%.结论:包涵体变性复性后生物活性大幅度提高,并且具有良好的重复性和稳定性,可作为幽门螺杆菌疫苗制备的候选抗原及临床检测的诸多方法的抗原原料.

• 单位
  西安交通大学