伪狂犬病病毒UL36蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

作者：陈玲超; 王兴娅; 李俊波; 李佳佳; 王晨; 李松楠; 王安铖; 孟鑫; 童武; 孔宁; 于海; 单同领; 童光志; 郑浩^*

来源：中国兽医科学, 2023, 1-7.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0038

• 伪狂犬病病毒
• UL36基因
• VP1/2
• 单克隆抗体

伪狂犬病病毒UL36基因编码的皮层蛋白VP1/2在病毒粒子组装过程中发挥重要作用。本试验以UL36基因为研究对象，将截短的UL36基因克隆入pCold I载体，构建了重组原核表达质粒pCold I-UL36。经诱导表达，将包涵体形式表达的重组蛋白经过变性、亲和层析及复性后获得了纯度较高的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠，通过细胞融合和间接ELISA方法筛选出1株能稳定分泌针对UL36蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株，被命名为UL36-6，抗体亚型鉴定结果为IgG1和κ，制备的腹水抗体中和效价及纯度高，Western- blot和间接免疫荧光试验结果表明单克隆抗体具有很好的特异性。综上所述，本研究成功制备出1株针对PRV UL36蛋白的单克隆抗体，为深入研究UL36蛋白的生物学功能奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 生命科学学院; 动物科技学院; 安徽农业大学; 东北林业大学